紫外可見(jiàn)分光光度計的工作原理是由光源發(fā)出連續輻射光,經(jīng)單色器按波長(cháng)大小色散為單色光,單色光照射到吸收池,一部分被樣品溶液吸收,未被吸收的光經(jīng)檢測器的光電管將光強度變化轉變?yōu)殡娦盘栕兓?,并?jīng)信號顯示系統調制放大后,顯示或打印出吸光度A(或透射比T),完成測定。
紫外可見(jiàn)分光光度計主要由電光系統、光學(xué)系統、光電系統、電子系統和數據處理、輸出打印系統等幾個(gè)部分組成。
在使用紫外可見(jiàn)分光光度計時(shí),需要注意一些使用的維護措施:
1、使用的吸收池必須潔凈,并注意配對使用。量瓶、移液吸管均應校正、洗凈后使用。
2、取吸收池時(shí),手指應拿毛玻璃面的兩側,裝盛樣品以池體的4/5為度,使用揮發(fā)性溶液時(shí)應加蓋,透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈,檢視應無(wú)溶劑殘留。吸收池放入樣品室時(shí)應注意方向相同。用后用溶劑或水沖洗干凈,晾干防塵保存。
3、供試品溶液濃度除各該品種已有注明外,其吸收度以在0.3~0.7之間為宜。
4、測定時(shí)除另有規定外,應以配制供試品溶液的同批溶劑為空白對照,采用1cm石英吸收池,在規定的吸收峰±2nm以?xún)?,測幾個(gè)點(diǎn)的吸收度或由儀器在規定的波長(cháng)附近自動(dòng)掃描測定,以核對供試品的吸收峰位置是否正確,并以吸收度zui大的波長(cháng)作為測定波長(cháng),除另有規定外吸收度zui大波長(cháng)應在該品種項下規定的測定波長(cháng)±2nm以?xún)取?/div>
5、選用儀器的狹縫寬度應小于供試品吸收帶的半寬度,否則測得的吸收度值會(huì )偏低,狹縫寬度的選擇應以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準,對于大部分被測品種,可以使用2nm縫寬。