紫外可見(jiàn)分光光度計是根據物質(zhì)分子對波長(cháng)為200~760nm的電磁波的吸收特性所建立起來(lái)的一種定性、定量和結構分析儀器。操作簡(jiǎn)單、準確度高、重現性好。波長(cháng)長(cháng)的光線(xiàn)能量小,波長(cháng)短的光線(xiàn)能量大。
在紫外可見(jiàn)分光光度計中,常見(jiàn)的光源有氙燈和鎂燈等,而樣品的光譜則可以通過(guò)單光束模式或雙光束模式進(jìn)行測量。具體來(lái)說(shuō),單光束模式指的是光線(xiàn)經(jīng)過(guò)樣品后直接進(jìn)入光譜儀進(jìn)行測量,而雙光束模式則是將光線(xiàn)分成兩束,一束經(jīng)過(guò)樣品,另一束則經(jīng)過(guò)一個(gè)空白的參比通道,再將兩種光線(xiàn)的吸光度進(jìn)行比較。此外還可以選擇不同的檢測器,如光電離檢測器和光電二極管檢測器等,以便對不同波長(cháng)范圍的光進(jìn)行測量和分析。
在使用紫外可見(jiàn)分光光度計時(shí),需要注意以下一些操作技巧:
1、樣品的制備:樣品的制備要仔細、準確,避免出現誤差。通常需要準確稱(chēng)量或配制樣品,以保證測量的準確性和可重復性。
2、波長(cháng)的選?。涸谶x擇測量波長(cháng)時(shí),應根據樣品的性質(zhì)和需要進(jìn)行選擇,避免測量范圍過(guò)寬或過(guò)窄。
3、參比溶液的配制:在使用雙光束模式時(shí),需要準備空白參比溶液,以便和樣品進(jìn)行比較。參比溶液應根據樣品性質(zhì)選擇適當的溶劑和波長(cháng)。
4、光路的調整:在使用單光束模式時(shí),需要調整光路,使光線(xiàn)準確進(jìn)入光譜儀。此外,還需要調整光強、波長(cháng)、積分時(shí)間等參數,以確保測量的準確性和可重復性。