用來(lái)測量待測物質(zhì)對可見(jiàn)光的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱(chēng)為可見(jiàn)分光光度計;紫外可見(jiàn)分光光度計用來(lái)測量待測物質(zhì)對可見(jiàn)光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器??梢詼y定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細菌細胞密度。
紫外可見(jiàn)分光光度法的定量分析基礎是朗伯-比爾(Lambert-Beer)定律。即物質(zhì)在一定濃度 的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比。
紫外可見(jiàn)分光光度計具體用途有哪些?
1、濃度鑒定
首先配置一系列的標準溶液,在一定波長(cháng)下,測試每個(gè)標準溶液的吸光度,繪制吸光度/濃度標準曲線(xiàn)。當測定未知濃度溶液時(shí),將測出的數值與標準曲線(xiàn)對比,即可獲知溶液的濃度。
2、純度鑒定
紫外可見(jiàn)分光光度計可用來(lái)檢驗化學(xué)物質(zhì)的純度。如果有機化合物在紫外可見(jiàn)區沒(méi)有明顯的吸收峰, 而它的雜質(zhì)在紫外區有較強的吸收峰, 就可以檢測出有機化合物的雜質(zhì)。
3、定性分析
將未知樣品與標準樣品放到同等環(huán)境下用紫外可見(jiàn)分光光度計測量,如果得到紫外吸收光譜的最大吸收峰和最小吸收峰波長(cháng)、吸收峰數量、位置等數據與標準樣品的數據一致,就表明未知樣品與標準樣品為同一種物質(zhì)。當沒(méi)有標準樣品時(shí),可通過(guò)查閱標準圖譜來(lái)分析判斷。