2100可見(jiàn)分光光度計是分析測試實(shí)驗室里常見(jiàn)的一種分析儀器,用于測定被測物質(zhì)在一定波長(cháng)照射下所產(chǎn)生的吸光度的大小,從而實(shí)現對物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析。在平時(shí)的實(shí)驗過(guò)程,發(fā)現在分光光度計使用問(wèn)題上,使用者多多少少都存在一些疑惑或使用不規范的問(wèn)題,下面就常見(jiàn)的一些問(wèn)題進(jìn)行討論。
01、關(guān)于2100可見(jiàn)分光光度計的預熱問(wèn)題
在一般分光光度計的使用說(shuō)明書(shū)上,要求儀器預熱時(shí)間約20分鐘;若是帶微處理器的分光光度計,開(kāi)機后儀器自動(dòng)進(jìn)入自檢(初始化)狀態(tài),約需1O分鐘左右。在分光光度計預熱這個(gè)環(huán)節上,很多使用者或多或少存在問(wèn)題,如開(kāi)機只預熱電路系統(不調節波長(cháng)、打開(kāi)吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過(guò)程就是預熱等等。
對帶微處理器有自檢功能的分光光度計,開(kāi)機后儀器自檢(初始化)結束后,在測定窗口上,設置所需波長(cháng)值,用一個(gè)吸收池裝上純凈水置于光路上,調“0000A”后,預熱儀器,當儀器顯示讀數不再變化后即可進(jìn)行測定。
對于紫外可見(jiàn)分光光度計,由于有雙光源(鎢燈與氘燈),為了延長(cháng)燈的使用壽命,開(kāi)機自檢完成后可以關(guān)掉測定時(shí)不用的光源燈。
02、關(guān)于2100可見(jiàn)分光光度計波長(cháng)準確度的檢查與校正
日常在使用分光光度計時(shí),是否要經(jīng)常進(jìn)行儀器波長(cháng)準確度的檢查?答案是否定的。當在日常測定中發(fā)現儀器測定靈敏度下降,這時(shí)才應進(jìn)行波長(cháng)準確度的檢查,簡(jiǎn)易的檢查方法(粗檢)是:儀器開(kāi)機后,調節波長(cháng)為580nm,在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙,若能觀(guān)察到一長(cháng)方形的黃色光斑,說(shuō)明波長(cháng)準確度屬正常范圍,否則就應進(jìn)行波長(cháng)校正。
當儀器經(jīng)過(guò)長(cháng)途搬運、受過(guò)機械振動(dòng)或更換光源燈泡后,必須進(jìn)行波長(cháng)準確度的檢查與校正。粗檢同上,其校正方法有:干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法、利用氘燈的特征發(fā)射線(xiàn)校正法。具體步驟可參考儀器使用說(shuō)明書(shū)。
03、關(guān)于吸收池的使用問(wèn)題
按照吸收池使用的基本順序分說(shuō)如下:
(1)吸收池的潤洗
吸收池裝液前必須用待裝溶液潤洗2~3遍,潤洗前是否要用純水先潤洗一遍呢?這可看具體情況區別對待。
如果初次用干的吸收池裝待測液(特別是有色溶液)時(shí),從維護保養吸收池的角度講,為減小其干玻面對顏色的吸附能力,便于用后吸收池的清洗,建議先用純水潤洗一遍,再用待裝溶液潤洗2~3遍;若后再用此吸收池裝濃度相近或更高濃度的溶液(如從小到大測定標準系列溶液的吸光度)時(shí),可直接用待裝溶液潤洗2~3遍即可。
標準曲線(xiàn)法定量時(shí),如果是先測定標準系列溶液的吸光度,當測到樣品溶液時(shí),由于測定的樣品溶液濃度比后一個(gè)標準溶液的濃度低或不可知時(shí),建議先用純水潤洗一遍,再用待裝溶液潤洗2~3遍。
(2)吸收池的裝液、擦拭與放置吸收池潤洗完成后注入待測溶液至池高的2/3~3/4處。
(3)吸收池成套性檢驗及處理新吸收池或吸收池使用一段時(shí)間后都必須進(jìn)行成套性檢驗。
04、關(guān)于吸光度測定重復性的問(wèn)題
分光光度計在測定過(guò)程中,發(fā)現同一個(gè)溶液在不同時(shí)問(wèn)里其測定結果不同,即重復性不好,其原因是什么?排除測定錯誤因素外,可能原因有:
(1)儀器預熱時(shí)間不夠或預熱方法不對所造成,應延長(cháng)預熱時(shí)間或采用正確的預熱方法。
(2)光電轉換器(如光電管)因長(cháng)時(shí)間使用其光電轉換效率發(fā)生了變化導致。這時(shí)標準溶液與待測溶液的吸光度都同樣變低,在相對定量時(shí)對結果影響很小。但是對這類(lèi)儀器,一般建議連續使用時(shí)間不應超過(guò)3h,若需長(cháng)時(shí)間使用,間歇30min。
05、其他問(wèn)題
(1)發(fā)現測定過(guò)程中的一些不良操作不利于儀器的維護、保養,使用者應盡可能避免。如在儀器的上方進(jìn)行操作(如倒溶液);拿出來(lái)的吸收池(或吸收池架)放在儀器的面板上;同實(shí)驗室不同儀器的吸收池混用等。
(2)關(guān)于防塵、防潮問(wèn)題
儀器一般都隨機附有一只塑料布罩,不使用時(shí)用其罩住整個(gè)儀器,這是很好的防塵手段。但發(fā)現很多實(shí)驗室里不用附來(lái)塑料布罩,而是自己用一塊普通布或做成布罩來(lái)覆蓋儀器,防塵效果不如塑料布罩理想。另外,在塑料布罩只放入數袋防潮硅膠,也能更好起到延長(cháng)防潮的功效。在防潮時(shí),如果儀器設有防潮干燥筒的,應經(jīng)常檢查,發(fā)現變色立即更換新的或加以烘干再用。
長(cháng)期停用的分光光度計,要定期開(kāi)機除潮,如每隔一個(gè)月通電預熱半小時(shí),以保持整機呈干燥狀態(tài),并且維持電子元件的性能。