(1)靈敏度高,選擇性好:由于分光光度法的入射光以棱鏡或光柵為單色器,同時(shí)在狹縫的控制配合下可得一條譜帶很窄的單色光,因此其測定的靈敏度、選擇性和準確度均比比色法高。紫外-可見(jiàn)光分光光度法可測定微量標準物質(zhì),測定靈敏度可達l~10ug/m,光度計定量測定的精密度可達0.5%,甚至可以更低。
(2)無(wú)需樣品分離裝置:由于分光光度法使用的是純度較高的單色光,因此利用此方法測定含有兩種或兩種以上樣品組分時(shí),不必先進(jìn)行樣品分離處理,只需選用樣品組分特征波長(cháng)的單色光就可進(jìn)行測定分析。
(3)有多種定量方法:分光光度法不僅可采用線(xiàn)性回歸方式進(jìn)行定量,而且可直接通過(guò)百分消光系數與摩爾消光系數換算公式進(jìn)行定量,因而在定量方式上較比色法更具有實(shí)效性。
紫外可見(jiàn)分光光度計的基本結構由五個(gè)部分組成:光源、單色器、吸收池、檢測器和信號指示系統。
(1)光源
紫外-可見(jiàn)分光光度計對光源的基本要求是應在儀器操作所需的光譜區域內能夠發(fā)射連續輻射,有足夠的輻射強度和良好的穩定性,而且輻射能量隨波長(cháng)的變化應盡可能小。分光光度計中常用的光源有熱輻射光源和氣體放電光源兩類(lèi)。
熱輻射光源用于可見(jiàn)光區,如鎢絲燈和鹵鎢燈,可使用的范圍在340~1000nm。氣體放電光源用于紫外光區,如氫燈和氘燈。近紫外區測定時(shí)常用氘燈,它可在160~375nm范圍內產(chǎn)生連續光源,是紫外光區應用zui廣泛的一種光源。
(2)單色器
單色器是能從光源輻射的復合光中分出單色光的光學(xué)裝置,其主要功能是產(chǎn)生光譜純度高的波長(cháng),且波長(cháng)在紫外可見(jiàn)區域內任意可調。
單色器一般由入射狹縫、準光器(透鏡或凹面反射鏡使入射光成平行光)、色散組件、聚焦組件和出射狹縫等幾部分組成。其核心部分是色散組件,起分光的作用。
(3)吸收池吸收池用于盛放分析試樣,一般有石英和玻璃材料兩種。石英池適用于可見(jiàn)光區及紫外光區,玻璃吸收池只能用于可見(jiàn)光區。在高精度的化學(xué)分析測定中,吸收池要挑選配對的。
(4)檢測器
環(huán)境監測檢測器的功能是檢測信號,測量單色光透過(guò)溶液后光強度變化的一種裝置。常用的環(huán)境監測檢測器有光電池、光電管和光電倍增管等。
(5)信號指示系統
其作用是放大信號并以適當方式指示或記錄下來(lái)。常用的環(huán)境檢測信號指示裝置有直讀檢流計、電位調節指零裝置以及數字顯示或自動(dòng)記錄裝置等。很多型號的分光光度計裝配有微處理機,可對分光光度計進(jìn)行操作控制和數據處理。